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培養(yǎng)基 - 成分

更新時間:2013-11-27   點擊次數(shù):737次

培養(yǎng)基的成分包括:碳源、氮源、礦物質(zhì),以及其他必需物質(zhì)。這些成分通過生物反應過程,生成生物物質(zhì)、生物化工產(chǎn)品,并放出CO2、H2O和熱量。 培養(yǎng)基的成分還可以由發(fā)酵過程中所需的元素出發(fā),如C、H、O、N、S、P、Mg、K等。此外,必要時還
有一些需要量很少的微量元素,如Fe、Zn、Cu、Mn、Co、Mo、B等。在發(fā)酵過程中某些生物本身不能合成的物質(zhì),如氨基酸、維生素或核苷酸等,必要時亦作為營養(yǎng)物質(zhì)加入到培養(yǎng)基中。
 
碳源 
具有雙重作用。生物在產(chǎn)生生物物質(zhì)或生物化工產(chǎn)品過程中,它不僅為其提供碳源,也為其提供能源。碳水化合物是微生物發(fā)酵中的主要碳源,包括淀粉、葡萄糖、蔗糖和乳糖等。此外,植物油如豆油、棉籽油、玉米油等亦常被應用作為碳源。這類油常與表面活性劑合用,以消除發(fā)酵過程中所產(chǎn)生的泡沫。甲醇可用以生產(chǎn)單細胞蛋白。正烷烴類可用以生產(chǎn)有機酸、氨基酸和維生素等,甚至二氧化碳也可作為光合細菌的碳源。 

氮源
包括無機氮源和有機氮源。無機氮源包括氨、銨鹽及硝酸鹽等,它們在被應用時應注意發(fā)酵中pH的變化;有機氮源包括氨基酸、蛋白質(zhì)及尿素等,有機氮源的加入往往加快了生物的生長。因考慮到成本因素,一些有機氮源,如黃豆餅粉、花生餅粉、棉籽餅粉、玉米漿、魚粉、酵母粉等常被選用。 

培養(yǎng)基的組成中除了水分外,碳源和氮源的含量是zui大的。碳源含量一般不超過10%,氮源含量較低,一般碳氮比應為3~4:1。碳、氮源含量不能過高的原因是避免產(chǎn)生基質(zhì)或產(chǎn)物對反應的抑制和因滲透壓過高引起細胞失水而死亡。 

礦物質(zhì) 
培養(yǎng)基中 Mg、P、K、S、Ca、Cl常是主要的礦物質(zhì)的組成成分,其他如Co、Cu、Fe、Mn、Mo及Zn也往往不可少,但需要量很小,可從其他主要培養(yǎng)基成分中得到。如是使用合成培養(yǎng)基就需要把這些微量元素加進去。它們不僅為生物生長所必需,也是為了得到某些產(chǎn)物所*者。例如生物合成青霉素或頭孢菌素需要一定量的硫;生物合成維生素B12需要一定量的鈷。 

維生素 
某些生物在培養(yǎng)過程中需要某些維生素,往往在天然培養(yǎng)基中已經(jīng)提供了必要的維生素,但在某些特殊情況下需單獨加入維生素。例如在谷氨酸生產(chǎn)過程中需加入生物素,某些植物細胞培養(yǎng)中需要硫胺素(維生素B1)。 

緩沖劑 

培養(yǎng)基廠商
由于發(fā)酵過程中pH對形成生物產(chǎn)物的影響很大,為維持穩(wěn)定的pH,常采用緩沖劑,例如碳酸鈣或磷酸鹽。后者除能調(diào)節(jié)pH外,還為培養(yǎng)基提供磷源。 前體或代謝調(diào)節(jié)劑 前體是指某一種化合物被加入到發(fā)酵培養(yǎng)基中之后,能直接參與產(chǎn)物的生物合成中去。如在青霉素G(即芐基青霉素)的發(fā)酵過程中,加入適當?shù)钠S基化合物(如苯乙酸)能明顯提高青霉素 G的產(chǎn)量。 代謝調(diào)節(jié)劑中包括抑制劑和誘導劑,當一種抑制劑加入到發(fā)酵過程中時能抑制不需要的產(chǎn)物,而大量產(chǎn)生所需的特定產(chǎn)物(或中間體)。如在四環(huán)素發(fā)酵中,加入溴化物能抑制金霉素(即氯四環(huán)素)的形成,從而增加四環(huán)素的產(chǎn)量。至于誘導劑,多數(shù)酶的生成需要它來誘導。在正常情況下,酶所需的基質(zhì)或基質(zhì)的類似物,可用作誘導劑。如曲霉產(chǎn)生α-淀粉酶時需要淀粉作誘導劑。
 
防沫劑 
也稱消泡劑,一種表面活性劑,能降低泡沫的表面張力,從而消除發(fā)酵中泡沫。在多數(shù)好氣發(fā)酵中需解決泡沫問題。泡沫形成的主要原因是由于在培養(yǎng)基中有蛋白質(zhì),從而在發(fā)酵液和空氣泡之間的界面上形成膜,這種膜不易被破壞。泡沫大量形成后,能進入發(fā)酵罐的排氣管道而造成發(fā)酵染菌及發(fā)酵液流失。常用的消泡劑為油脂類、酯類、硅油及聚氧乙烯-聚氧丙烯甘油醚。加入消泡劑能降低氧傳遞率達50%,因此消泡劑應盡量少加。 

在大規(guī)模連續(xù)發(fā)酵培養(yǎng)單細胞蛋白中,需將發(fā)酵液循環(huán)以充分利用其中的營養(yǎng)物質(zhì)。但在循環(huán)過程中需調(diào)節(jié)其中營養(yǎng)物的含量水平。采用此工藝時,常注意防止在單細胞蛋白飼料中,過多積累不必要的其他代謝物。 動物細胞的培養(yǎng)基,包括葡萄糖(有時加半乳糖)、氨基酸(有時加蛋白水解液)、維生素、激素、無機鹽及血清等,其中血清常是必要的,且含量要占5%~10%。由于它的來源有限,價格高昂,因此正在進行無血清培養(yǎng)的研究。植物細胞的培養(yǎng)基,除了包括微生物培養(yǎng)基的基本成分外,還必須包含植物激素(如生長素、細胞分裂素等)、植物生長調(diào)節(jié)劑(人工合成的外源激素)及必要的前體。