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體內多數器官含有一定濃度的溶菌酶，但腎臟和脾臟的含量較多。單核細胞與巨噬細胞的溶菌酶位于細胞表面，故其釋放活躍，而嗜中性粒細胞的溶菌酶位于胞漿深層，只在細胞裂解時才釋放出來。正常人尿中無溶菌酶。某些疾病患者血清或體液內的溶菌酶活性值有顯著差別，故測定溶菌酶日益受到臨床重視。溶菌酶為正常機體免疫防御機制的組成部分，因具有溶解細菌細胞壁的作用而得名。在人體內，它存在于嗜中性粒細胞、單核細胞和巨噬細胞內；也存在于粘膜分泌液中，成為體表防御因素之一。

1．原理 根據溶菌酶能使革蘭陽性菌細胞壁溶解，尤其是對腐生菌，如溶壁微球菌（M．1ysodeikticus）zui為敏感，故常以溶解溶壁微球菌為指標，對溶菌酶的活性值進行測定。常用的方法有瓊脂平板法與比濁法。新近還根據免疫擴散法中抗原抗體反應的原理而建立了溶菌酶免疫測定法，由測酶活性改測酶含量，初步探討認為此法具有特異、靈敏、準確等優(yōu)點?，F將三種方法分別介紹如下。

2．實驗方法
（1）瓊脂平板法 用0．067mol／L，pH6．4 PBS將瓊脂配成1％濃度，加溫溶解后加50mg／100mL溶壁微球菌菌粉混合制成平皿，凝固后打成直徑2mm的小孔。分別加溶菌酶標準應用液及標本20gL，置37℃擴散18h，用卡尺測溶菌區(qū)域直徑，根據標準液濃度和溶菌環(huán)直徑用半對數表制成檢量線，查標準曲線求檢品溶菌酶活性值。

（2）比濁測定法 取溶菌酶標準應用液（5、10、15、20、50ug／mL）及標本各0．1mL分加至試管，每管加基質液6mL（溶壁微球菌基質液240mg／L）混勻，置37℃水浴10min，立即混懸，用600mn波長測A值，以溶壁微球菌濁度的變化在標準曲線上查出溶菌酶的活性
值。

（3）免疫測定法 ①免疫單擴散板制備：將單價特異性兔抗人溶菌酶抗體加入1％瓊脂糖液中（50℃），制成含5％抗血清凝膠板，用打孔器打成直徑為3mm的小孔，當天使用；②溶菌酶免疫測定：將10btL標本加于免疫擴散板的小孔中，保持濕度在室溫下反應，當沉淀環(huán)達zui大限度后，用帶測微計的放大鏡讀其直徑，以直徑的平方在標準曲線上查出溶菌酶的相應濃度；③標準曲線制備：取溶菌酶lmg溶于0．05mol／L，pH6．4PBSlmL中，配制成5、10、20、40、80、100、200、300／lS／mL 8種濃度，分別加人免疫擴散板小孔中，經反應后，以沉淀環(huán)直徑的平方為橫坐標，溶菌酶濃度為縱坐標，繪制標準曲線。

3．正常參考值與臨床意義 正常人尿液和腦脊液（CSF）中溶菌酶為0；血清中溶菌酶正常參考值：比濁法為11．80±2．2mz／L；平板法為20．40±2．70mg／L；免疫測定法為10—40mz／L（X±2S）。由于方法與實驗條件不同，測定結果有差別，故各實驗室應建立自己的正常參考值。

血清溶菌酶測定對鑒別各型急性白血病有一定意義。急粒及急單血清溶菌酶升高；而急淋、急性紅白血病降低或正常；經化療奏效病情緩解后，溶菌酶水平可恢復。血清溶菌酶測定可作為判斷局限性腸炎活動性的一個有用的指標，并且有助于判斷臨床過程的嚴重程度和對治療的反應。

尿內溶菌酶含量增高的原因有：①腎小管損害；②高溶菌酶血癥；③腎組織破壞。臨床上測定尿溶菌酶主要是作為腎小管損害的一個指標，各種原因的腎小管損害都可引起尿溶菌酶含量增高。腎移植病人定期檢查尿溶菌酶活性十分必要，如移植腎接受良好，則溶菌酶活性在7d內恢復正常；若尿中過多的溶菌酶持續(xù)存在，必須疑及排斥反應的發(fā)生。

細菌性腦膜炎患者CSF溶菌酶含量遠較病毒性腦膜炎患者的含量高，因此，CSF溶菌酶測定對二者的鑒別有重要意義。此外，CSF溶菌酶測定對中樞神經系統(tǒng)的原發(fā)性或繼發(fā)性腫瘤有一定輔助診斷價值。