目前世界上常用的蛋白濃度檢測方法是：BCA蛋白定量試劑盒(BCA?Protein?AssayKit)和Bradford蛋白定量試劑盒(Bradford?Protein?Assay?Kit)。BCA?法與傳統(tǒng)方法相比，更簡單、更穩(wěn)定、更靈敏度。BCA法測定蛋白濃度兼容性亦很好，不受大部分樣本中其他成分的影響，對于5%以內的SDS、Triton?X-100、Tween?20、?Tween?80具有很好的兼容性。BCA法測定蛋白濃度易受螯合劑、高濃度的還原劑影響。在BCA法測定蛋白濃度前應盡量使EDTA濃度≤m10M;?DTT濃度≤1mM，2-ME≤0.01%。

規(guī)格：250T

保存：室溫,避光,

有效期：12個月

用途：總蛋白定量的二喹啉甲酸/BCA分析

說明：主要由BCA溶液、Cu溶液、BSA標準品組成,在562nm處測吸光值,檢測范圍在200-1000ug/ml。

 

操作注意：

1、?蛋白標準(BSA)粉末溶解于蛋白標準配制液后，即獲得蛋白標準原液，該原液中含有防腐劑，不影響后續(xù)檢測，該蛋白標準原液-20℃保存。

2、?待測蛋白溶解于什么樣的稀釋液中，蛋白標準也宜溶解于什么樣的稀釋液中，否者待測蛋白與蛋白標準中所含非蛋白成分不一致，有可能導致測定不準確。

3、?待測蛋白和蛋白標準加入BCA工作液后，如果發(fā)現(xiàn)檢測效果不佳，可以室溫放置2h或60℃放置30min，顏色會隨著時間的延長不斷加深。顯色反應也會隨溫度升高而加快。如果濃度較低，可以適當延長孵育時間或在較高溫度下孵育。
 

4、?測定標準曲線時發(fā)現(xiàn)隨著標準品濃度的增加吸光度或顏色沒有明顯變化，可能的原因是樣品中含有嚴重干擾BCA法測定蛋白濃度的物質。


二價銅離子在堿性的條件下，可以被蛋白質還原成一價銅離子，一價銅離子和*的BCA　Solution　A（含有BCA）相互作用產(chǎn)生敏感的顏色反應。兩分子的BCA螯合一個銅離子，形成紫色的反應復合物。該水溶性的復合物在562nm處顯示強烈的吸光性，吸光度和蛋白濃度在廣泛范圍內有良好的線性關系，因此根據(jù)吸光值可以推算出蛋白濃度。


BCA蛋白定量試劑盒操作方便，快捷！